MST1与YAP1在食管疾病中的表达及意义

来源：核心期刊咨询网核心期刊论文2014-04-02 14:281

摘要：1 材料与方法 1 .1 材料来源 2010 年1 月-2011 年12 月, 我院内镜室食管癌前疾病标本90 例, 其中男57 例, 女33 例, 年龄33 ~ 74 岁, 平均53 1.7 岁; 食管炎、B ARRET T 食管及不典型增生组各30 例, 所有病例均行内镜检查并取组织活检, 联合镜下及本院病理科

　　1 材料与方法

　　1 .1 材料来源

　　2010 年1 月-2011 年12 月, 我院内镜室食管癌前疾病标本90 例, 其中男57 例, 女33 例, 年龄33 ~ 74 岁, 平均53 1.7 岁; 食管炎、B ARRET T 食管及不典型增生组各30 例, 所有病例均行内镜检查并取组织活检, 联合镜下及本院病理科检查结果, 最终确定诊断。2008 年8 月)2011 年12 月, 我院内镜室及术后食管癌标本40 例, 均经病理科检查确诊为食管腺癌, 其中男22 例, 女18 例; 年龄35 ~ 72 岁,平均52.91 岁; 有淋巴转移者22 例, 无淋巴转移者18 例。食管癌前疾病病人行胃镜检查及组织活检前均未行药物治疗, 食管癌病人手术前均未行放化疗治疗。所有食管标本均经40 g/ L 的多聚甲醛溶液固定, 石蜡包埋,4 Lm 厚切片。

　　1 2. 实验方法

　　应用 PV-6000 免疫组化二步法检测 MST1、YAP1 的表达。具体操作步骤参照说明书进行。兔抗人 MST1 多克隆抗体、兔抗人YAP1 多克隆抗体均购自北京博奥森生物技术有限公司, 辣根酶标记羊抗兔Ig G 多聚体、抗体稀释液及二氨基联苯胺显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

　　1 3. 结果判定

　　MS T1 以细胞质中出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性表达。YAP1 以细胞核中出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性表达。应用光学显微镜随机选取10 个高倍视野( 400 倍) , 每高倍视野下计数200 个细胞,计算阳性细胞百分率, 最后取平均值, 以阳性细胞百分率10 % 为阳性, < 10 % 为阴性。

　　1 4. 统计学处理

　　采用SPSS 19 .0 软件进行统计分析, 各组间率的比较采用卡方检验, 相关关系采用Spear man 相关分析, 以 P < 0 .05 为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2 1. MS T1 、YAP1 在不同食管病变中的表达

　　MS T1 在食管炎、BARRET T 食管、不典型增生及食管癌组织中的阳性表达率分别为93 %( 28/30)、80 %( 24/ 30)、53 %( 16/ 30)、23 % ( 9/ 40) ; 而YAP1 在以上各组织中的阳性表达率分别为0、13 .3 %( 4/ 30)、50 .0 %( 15/ 30)、83 .0 %( 33/ 40)。食管癌组MST1的表达与食管炎、BARRETT 食管及不典型增生组比较差异有显著意义( V2= 7 .099 ~31 .733 , P < 0 .05) ; 不典型增生组 MS T1 表达与食管炎、BARRETT 食管组比较差异亦有显著 性(V2= 10 .313 、4 .800 , P < 0 .05)。食管癌组 YAP1 的表达与食管炎、BARRETT 食管及不典型增生组比较差异有显著性( V2= 8 .402 ~ 43 .572 , P < 0 .05) ; 不典型增生组YAP1 表达与食管炎、BARRETT 食管组比较差异亦有显著性( V2= 10 .313 、9 3.20 , P < 0 0.5)。

　　2 2. MS T1、YAP1 的表达与食管癌临床病理特征的关系

　　MS T1、YAP1 的阳性表达与病人的性别和年龄无关( P > 0 .05) , 而与组织分化程度及淋巴结转移有关( V2= 5 .683 ~ 9 0.38 , P < 0 0.5)。

　　2 3. 食管癌组织中 MST 1 与 YAP1 表达的相关性

　　在食管癌组织中,MST1 与YAP1 异向表达38 例( MS T1 阳性而 YAP1 阴性7 例, MST1 阴性而 YAP1阳性31 例) , 同向表达2 例( 共同阳性2 例) , MST1 与YAP1 的表达呈负相关( r = - 0 4.51 , P < 0 .05)。

　　3 讨 论

　　对于多细胞生物来说, 维持其内环境的稳定是最重要的。信号通路的异常调节会促进细胞的增殖及抑制细胞的凋亡, 最终导致恶性转化。Hippo 信号通路在人类中高度隐藏, 最初于黑腹果蝇中发现,主要由 MST 、YAP 等参与。

　　MST1 基因是果蝇 Hi ppo 基因在哺乳动物中的直系同源基因, 也称为丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶4( sST K4)。MST1 蛋白分布于细胞质中, 具有高度的保守性, 它介导了一条新的抑制肿瘤发生的信号通路, 是一种抑癌蛋白, 它不仅可以引起细胞凋亡, 还可抑制细胞的增殖。然而, Hippo 信号通路的异常调节会导致 MST1 的磷酸化活性降低, 最终导致肿瘤的形成。本研究结果显示, MST1在由炎症到癌变的过程中, 其阳性表达率呈逐渐降低趋势。这表明 MST1表达的减少会降低对肿瘤的抑制作用。

　　YAP1 是 Hi ppo 通路中的下游效应子, 是转录控制的共激活剂。Hi ppo 信号减低, YAP 的磷酸化将会减低甚至消失, 使其在细胞核内定植。在核心内部, YAP 与细胞核内的转录因子相结合, 促进YAP 转录进而使得细胞核内其他的目标基因活化,最终导致细胞的增殖以及抑制细胞凋亡。本研究结果显示, 在食管癌及不典型增生组中, YAP1 同时表达于胞质和胞核中, 且显著高于其他两组。这表明在慢性炎症癌变过程中,YAP1 表达的增加促进了炎症性疾病向恶性肿瘤的转变。

　　MS T1 对 YAP 具有调控作用, 当 Hi ppo 信号通路激活后, MST1 通过上游因子刺激发生磷酸化,其磷酸活性增强可刺激其他复合体发生磷酸化, 最后可通过Lats 蛋白与YAP 结合, 使YAP 发生磷酸化, 使其在细胞质内定植, 抑制 YAP 的活性。相反, 当 Hippo 信号通路失活, MST 表达不足, 导致YAP 的磷酸化活性减低甚至消失, 使其进入细胞核内与其他的转录因子相结合, 从而促进细胞的增殖、抑制细胞凋亡。本研究结果显示, 同一标本中MS T1的表达与 YAP1的表达呈负相关, 并且随着病程的进展MST1对 YAP1 的调控作用逐渐减弱。

　　综上所述, 在食管黏膜癌变过程中, Hi ppo 信号通路发挥着重要的调节作用, 为进一步明确炎症与食管腺癌发生的联系提供了依据。MST1、YAP1的检测为阐明食管炎向食管腺癌的恶性转化提供了新的分子机制, 这也将成为食管腺癌早期预防、治疗和预后判断的新靶点。