春兰‘黄梅’ב黄荷’杂交F1根状茎的组培快繁研究

来源：核心期刊咨询网时间：12

摘要：摘要：[目的]筛选春兰组培各阶段的最佳培养条件，建立优良的春兰快繁体系，为春兰大规模生产开发提供科学依据。[方法]以春兰黄梅黄荷F1无菌播种形成的根状茎为试验材料，通过基本培养基(1/2MS、改良1/2MS、HyponexⅡ)和植物生长调节剂(6-BA、NAA、TDZ、IBA)

　　摘要：[目的]筛选春兰组培各阶段的最佳培养条件，建立优良的春兰快繁体系，为春兰大规模生产开发提供科学依据。[方法]以春兰‘黄梅’ב黄荷’F1无菌播种形成的根状茎为试验材料，通过基本培养基(1/2MS、改良1/2MS、HyponexⅡ)和植物生长调节剂(6-BA、NAA、TDZ、IBA)等因子不同组合，围绕增殖、分化、生根等阶段建立其再生体系，并对培育出的组培苗进行移栽练苗。[结果]增殖最适培养基为3.0g·L-1HyponexⅡ+0.5mg·L-16-BA+3.0mg·L-1NAA+1.0g·L-1活性炭(AC)+30.0g·L-1白砂糖(Su)+7.0g·L-1琼脂(Ag)，生長速度和增殖系数分别为7.31和6.02;分化最适培养基为2.0mg·L-16-BA+0.3mg·L-1NAA+30.0g·L-1Su+7.0g·L-1Ag，分化率、芽诱导个数和株高分别为90.00%、5.44个和2.53cm;生根最适培养基为1.5mg·L-1IBA+2.0g·L-1蛋白胨+1.0g·L-1AC+25.0g·L-1Su+7.0g·L-1Ag，生根率、生根数和平均根长分别为100.00%、8.03条和3.00cm;春兰组培苗练苗移栽60d后存活率达96.53%。[结论]新型基本培养基HyponexⅡ(3.0g·L-1)对春兰增殖培养有高效促进作用，高水平的IBA(1.5mg·L-1)有利于春兰组培苗生根壮苗。

　　关键词：春兰;增殖培养;分化培养;生根培养

　　《内蒙古农业大学学报》(自然科学版)(双月刊)创刊于1957年，是内蒙古高校中创办较早的学报，也是内蒙古创办较早的科技期刊，已有50年的办刊史，前身为《内蒙古畜牧兽医学院学报》和《内蒙古农牧学院学报》，1999年更名为《内蒙古农业大学学报》。

　　0引言

　　(研究意义)春兰Cymbidium goeringii为兰科Orchidaceae兰属Cymbidium的多年生草本植物，是我国兰科植物(国兰)中资源最丰富、分布最广的种类之一，一般于早春开花，花姿优美，气质优雅，备受国人喜爱，有“天下第一香”和“花中君子”的称号;然而，高昂的售价与新品种培育周期漫长等问题一直制约着春兰的规模化发展，长期以来国内春兰的商品市场主要依赖日本、台湾等地的返销苗，该类苗与原生苗相比存在着成活率差、倒苗等问题。目前兰花快速繁殖的主要途径是通过组织培养技术，因此如何借用组织培养技术培育开品好、生长周期快的本土优良新品种提升产品自信、丰富春兰市场是解决这一问题最有效的方法。(前人研究进展)近年来关于国兰杂交种的组培技术已有不少报道，常见于‘宋梅’ב集圆’、‘宋梅’ב韩国桃花’和‘春绿兰’ב虎雪兰’等;前人对国兰组培研究的基本培养基多使用MS培养基，后期兴起的Hyponex培养基为兰花组培提供了更为简便的配制方法，多见于蝴蝶兰、墨兰等研究中。(本研究切入点)目前关于春兰‘黄梅’ב黄荷’F1的研究尚未见报道，同时Hyponex对国兰生长影响的报道较少，尤其针对春兰组培的研究仅在简报中出现;此外，本课题组的前期研究发现，不同品种的春兰对组培条件的需求仍然存在差异，缺少科学完整且适用于工厂规模化生产的技术理论，为此，本试验对春兰‘黄梅’ב黄荷’F1根状茎及其组培苗的增殖、分化、生根培养和炼苗移栽的关键影响因子进行了相关研究。(拟解决的关键问题)本试验选取了稳定性强及市场上易获取的基本培养基(MS和Hypo-nexⅡ)、细胞分裂素(6-BA和TDZ)、生长素(NAA和IBA)和有机添加剂(蛋白胨)为春兰‘黄梅’ב黄荷’F1组培各阶段寻找最佳培养条件，旨在建立优良、高效的春兰快繁体系，形成规模化种植，从而提高春兰在我国花卉市场的竞争力。

　　1材料与方法

　　1.1试验材料

　　以2015年9月取自福建连城兰花股份有限公司的春兰‘黄梅’ב黄荷’F1无菌播种形成的根状茎为试验材料。试验于福建农林大学下安园林植物实验室进行。

　　1.2试验方法

　　1.2.1增殖培养 采用L9(34)正交试验研究不同基本培养基、6-BA和NAA对春兰根状茎增殖培养的影响(表1)，所有处理附加1.0g·L-1活性炭(AC)+30.0g·L-1白砂糖(Su)+7.0g·L-1琼脂(Ag)，pH 5.6-5.8。选取长1.5-2.0cm的健壮根状茎(五分支)接人上述增殖培养基中。试验每组接种10瓶，每瓶接种5个材料，2次重复。光照时间12h'd-1，培养温度(26±2)℃，散射光培养，120d后统计根状茎的生长速度和增殖系数。

　　生长速度=(增殖后根状茎质量-接种时根状茎质量)/接种时根状茎质量(1)

　　增殖系数=接种根状茎上新增侧枝数/接种根状茎数(新增根状茎长度>0.5cm)(2)

　　1.2.2分化培养 以1/2MS培养基(30.0g·L-1Su，7.0g·L-1Ag，pH 5.6～5.8)为基本培养基，针对NAA(0.3和0.5mg·L-1)、6-BA(0.0，1.0，2.0和3.0mg·L-1)和TDZ(0.0，0.5，1.0和1.5mg·L-1)配置培养基探索其对春兰根状茎分化的影响(表2)。材料选取、接种方式同1.2.1。光照时间12h·d-1，培养温度26±2℃，前30d散射光培养，之后转入500-1500lx光强下培养，120d后统计根状茎的分化率和芽诱导个数。

转载请注明来自：http://www.qikan2017.com/lunwen/nye/15190.html