23例输血前ABO血型正反定复查的鉴定比较

来源：核心期刊咨询网时间：2014-06-16 11:1312

摘要：【关键词】 微柱凝胶 ；正反定型；不规则抗体；亚型； 【摘要】目的：正确对ABO血型鉴定，可以减少输血反应及血液制品的浪费。方法：采用全自动微板法对受血者血型进行复查，对不符合者进行抗人球蛋白试验，吸收放散试验等方法进行鉴定 。结果：对3167例受血

　　【关键词】 微柱凝胶 ；正反定型；不规则抗体；亚型；

　　【摘要】目的：正确对ABO血型鉴定，可以减少输血反应及血液制品的浪费。方法：采用全自动微板法对受血者血型进行复查，对不符合者进行抗人球蛋白试验，吸收放散试验等方法进行鉴定 。结果：对3167例受血者进行复查，其中有23例不符合，不符合的主要原因为不规则抗体，其次为亚型。讨论：输血前对受血者血型进行复查，可以避免血型错误引起的溶血反应及无效输血至血液制品的浪费。

　　常规的ABO定型包括用已知特异性抗体试剂血清检查红细胞表面的抗原(正定型，)以及用已知血型的红细胞检查血清中的血清中的特异性抗体（反定型）[１]，只有正反定型相符合时才能说是准确定型。而ABO抗原的血型存在很多的变异型，所以在常规的临床检验实验室血型鉴定过程中，正常采血后进行ABO反定型可提高血型的准确性。但ABO反定型多采用手工法操作，由于存在技术，试剂，被鉴定红细胞血型抗原和被鉴定血清内抗体因素以及反应时间，实验温度，实验方法的局限性，导致弱的抗体，不规则抗体，冷凝集素的漏检，易出现血型错误等现象,随着自动化检验设备的应用,我们将自动加样技术引入到微板法鉴定ABO反定型中取得满意效果。笔者就本实验室2010年10月-2013年10月正反定型不符合者，用经典的方法进一步鉴定23例受血者进行比较分析，找出正反定不符合的主要原因。

　　材料和方法

　　1. 实验对象；本实验组为2010年10月-2013年10月我院输血前采集患者配血标本3167例，

　　其中有输血史患者9例，孕产妇７例。年龄15－84，有23例正反定型不符标本。

　　2. 仪器与试剂；正定型抗-A.抗-B血清为单克隆抗体（抗A效价１／128，抗B效价1／64），反定性A B标准红细胞和不规则抗体筛查细胞均由上海血液中心提供。微柱凝胶卡LISS/Coombs，BioVue system离心机，孵育箱和全自动加样系统均为美国强生公司产品。采用全自动微板法对受血者血型进行筛查，检查方法同文献[２]；

　　3. 方法；采用全自动微柱凝胶法对血型进行正反定，提高了ABO亚型、弱抗原、弱抗体的检出敏感性。对正反定不符合者由资深检验者用经典的抗人球蛋白试验，白蛋白凝集试验，吸收放散试验等方法。检测血清中不规则抗体，用O型谱细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号）进一步鉴定抗体的种类，选择缺少相应抗原的A型和B型3-5%红细胞作反定型的试剂红细胞。自身免疫性溶血性贫血患者包被的lgG抗体，在４５℃进行放散试验，做到准确定型。

　　结 果

　　23例正反定型结果不符的详细情况见表1

　　正定型 反定型      复查鉴定结果     例数           原因

　　A O             AB 3           不规则抗体

　　A O A             4            不规则抗体 ，冷凝集

　　A AB           AB亚型        2            亚型

　　B O             B             3             不规则抗体

　　B O            B亚型         2              亚型

　　B AB           B 1 肿瘤患者

　　B AB          AB亚型          2             亚型

　　O A           A亚型           2             亚型

　　O B           B亚型          1             亚型

　　AB A          AB             2             冷凝集

　　AB O B 1 自身溶血性贫血

　　讨 论

　　从2010年10月以来我科以全自动微板法取代了从前的手工玻片法及试管法进行ABO正反定型的工作，该方法具有重复性好，稳定性高[３],极大地降低了检验者的劳动强度。但是存在成本费较高，临床医生往往开具价廉的非卡氏法，而临床实验室标本量大，实验反应时间较短。血液中存在的特异性lgM抗体在室温反应强，实验温度一般在室温多数为（１８℃－２５℃）。而对于一些弱抗体，不规则体抗体，冷凝集素等容易存在漏检而无法准确判断其血型。这种现象约占比例0.72%（23／3167）临床检验时容易疏忽，所以检验者要格外仔细小心，防止漏检和误判。

　　表1显示，产生正反定血型不符合的主要原因为不规则抗体，占43.4%（10／23），其次为亚型，占39.1%（9／23），两者合计占82.5 %（19／23），不规则抗体是指ABO血型系统以外的抗体，大多数为lgG,,它是由于患者输血或妊娠以及输液免疫产生的抗体[４]，是引起迟发性免疫反应的主要原因，患者一旦输入具有相应抗原的红细胞，患者轻者出现发热，贫血，黄疸和蛋白尿，重者甚至危及生命。大约有0.3%-2%的人群个体血清中含有这种抗体[５]。亚型指同一血型抗原，但抗原结构和性质功能或者是抗原位点数可能有一的差异性，使用符合卫生部批准的标准ABO抗血清可以防止亚型的漏检。另外，冷凝集素和其它原因占17.5%（4／23）。因为我们在试验过程中常用的玻片法和微板法均属于盐水介质反应，血液中存在的lgM抗体在22-25℃室温中反应强，而在一些高海拔地区一年中大多数室温均在20℃以下，这时一些含有冷凝集素的血液可产生凝集现象，这给血型鉴定带来部分错误的判断，因此，对于复查试验中正反定不符的，可用37℃生理盐水洗涤红细胞去除其表面的冷凝集素，观察抗原抗体是否仍有凝集反应，若无凝集，可准确判定血型。自身免疫性溶血性贫血患者包被的lgG抗体，正反定型存在争议时，可在４５℃进行放散试验，做到准确定型。ABO抗体以外的不规则抗体可由经验丰富的检验师用O型谱细胞进一步筛查，由于血型系统复杂多样，临床工作中有时会遇到定型困难，根据条件报请本地血液中心进行ABO亚型鉴定，因此为了保证输血安全，提高输血疗效，避免血型错误引起的溶血反应及无效输血至血液制品的浪费，必须在输血前对患者作出正确的血型鉴定。

　　参考文献

　　【1】，王培华 田兆嵩 田俊士, 输血技术手册【M】北京：2002.４

　　【2】[葛红卫 王鸿捷 韩卫, ABO血型自动化检测方法的建立【J】.中国输血杂志，1998，11（2）：63

　　【3】夏卫 郭永芳 姚锦炎 ，ABO血型全自动微板法检测法可靠性探讨【J】中国输血杂志，2000，13（3）：167

　　【４】吕鹏，最新输血技术手册【M】北京：199４，１９４－１９５

　　【５】萧星甫, 输血技术手册【M】成都：199４，２９－３０

转载请注明来自：http://www.qikan2017.com/lunwen/yix/4944.html